经（jīng）过我们多年生产实践栽培总结出来的经验是（shì）选用当年表现优异的羊（yáng）肚菌子实体进行组织分离（lí）以后，再繁（fán）育出来的菌种进（jìn）行栽培播（bō）种，由于（yú）转代次数少，变异（yì）性概（gài）率低。再进（jìn）行播种（zhǒng），基本可以（yǐ）保障（zhàng）稳（wěn）定（dìng）的出菇率（lǜ）。综上所述，掌握成熟的羊肚菌育（yù）种（zhǒng）技术是必要的。以下（xià）为（wéi）大家详细的介绍（shào）羊肚（dù）菌菌种分离及提纯复壮技术：
一，选种菇  正常情况在清晨还没有浇水之前采摘6分熟的，没有病害感染，虫（chóng）害咬食的（de）健康羊肚菌作（zuò）为种菇（gū），还要看菇（gū）形与其母本的外观形态相似度越（yuè）高越好。采菇以后不（bú）要带土装入塑（sù）料袋中，根（gēn）据不同品种（zhǒng）写（xiě）好标签。
二，种菇处理  将采到的种菇进行测量（liàng），称（chēng）重，并做好详细记录，测试种菇高，菌（jun1）柄直径，菌帽直径，和菌帽高度。

三（sān），准（zhǔn）备工作  将制备好的PDA 培养基试管，无菌水，储水罐，酒精棉，无（wú）菌棉摄子，酒精灯，火机（jī），种（zhǒng）菇等物品放到无菌操作台上，将杀菌灯开好，无菌风机同时打开（kāi），20分钟后就（jiù）可以进行分离羊肚菌（jun1）菌种的操作了（le）。也可（kě）以在接（jiē）种箱（xiāng）中（zhōng）进行（háng），把上述物品全部放入（rù）接种箱。接（jiē）种箱封（fēng）闭好（hǎo）以（yǐ）后用二氯异（yì）氰悄酸纳（nà）薰蒸30分钟（zhōng）即可（kě）开始（shǐ）分离羊肚菌菌种的工作了。

四，分离菌种  1，带好手套（tào），伸入无菌操作台的（de）无菌（jun1）区，或接种箱内（nèi），先用酒精棉球对双手手（shǒu）套外（wài）表进（jìn）行彻底擦拭消毒（dú），然后用无菌（jun1）水对羊肚（dù）菌（jun1）种菇进行（háng）冲洗冲洗过程的水（shuǐ）倒入储水（shuǐ）罐中，内外都要（yào）冲洗，冲洗时间为2-3分钟，冲洗以后用（yòng）无（wú）菌（jun1）棉（mián）吸干羊肚（dù）菌表（biǎo）面水（shuǐ）分。然（rán）后将攝子用酒（jiǔ）精棉消毒（dú）处（chù）理以（yǐ）后（hòu），放在酒精灯火焰顺（shùn）风方向燃烧消毒，再将羊肚菌菌帽与菌柄处掰断，将菇帽部分放到（dào）一边，只用菌柄部分，再拿起一支试管（试管（guǎn）和菌柄同时用左手拿（ná）好，在酒精灯火焰顺风（fēng）处取（qǔ）下棉（mián）塞，棉塞夹（jiá）在右（yòu）手中指和无名指之间，注意塞入试管部分的棉塞（sāi）向外，不要（yào）与手接触，右手的拇（mǔ）指和食指拿（ná）摄子（zǐ）夹取菌柄与（yǔ）菌帽断（duàn）开处的3毫米见方的一（yī）块（kuài）羊肚菌组织，接入试管斜（xié）面培养基前端，塞好棉塞，放在（zài）旁边，注意始（shǐ）终（zhōng）保持（chí）试管培养基平面向下，轻拿轻放。然后再进行下一支试管的操作（zuò）。

五（wǔ），培养  将分离好的菌（jun1）种贴好标签：标签内容包括日期（qī），品种名称等（děng）信息（xī）。然后就可以（yǐ）放在20-23度的条件（jiàn）下恒温培（péi）养。注意（yì）每（měi）天观察长势，杂菌感染（rǎn）严（yán）重的及时挑出。感染轻微的可以（yǐ）保（bǎo）留进行提纯处（chù）理。

六，提（tí）纯  在分离的过程中，难免有杂菌感染，根据羊肚菌菌丝生长速度快的特点，即使有羊肚菌菌丝与（yǔ）杂菌共（gòng）同萌发生长（zhǎng），经过三天（tiān）培养，羊肚菌菌丝长势会超过（guò）杂菌（jun1）一大（dà）截，遇到（dào）这种情况时（shí）就可以进行提纯处理：
1，准备工作：准备提纯的菌（jun1）种（zhǒng），空（kōng）PDA试管培养（yǎng）基，酒精灯，酒精（jīng）棉，接种钩，火机。消毒处理（lǐ）和上述方法一致。
2，提纯流程（chéng）  戴好手套（tào），用酒精棉擦拭消毒，将接种钩（gōu）擦拭消毒，然后在酒精灯火焰顺风（fēng）方向（xiàng）取下（xià）等待提纯菌种（zhǒng）试管棉塞，用接种钩在酒精灯火焰处（chù）灼烧（shāo）消毒处理以（yǐ）后将原（yuán）来接入的已经感染（rǎn）杂菌的组（zǔ）织块部位（wèi）的培养（yǎng）基一同钩（gōu）出试管，没有感染（rǎn）杂菌（jun1）长（zhǎng）有（yǒu）羊（yáng）肚菌菌丝的（de）培（péi）养基保留1-2厘米即可。注意接种钩尽量不要接触到（dào）杂菌感染的（de）部分。然后仔细对接种（zhǒng）钩进行彻底消毒处理以后就可以取保留的羊肚（dù）菌纯菌丝接入新的PDA培养（yǎng）基中，大小以（yǐ）3毫米见方一块（kuài）为宜。然后将提纯后的试管贴好标签，做好记录。再（zài）放到20-23度进行恒（héng）温（wēn）培养。
七，菌种保藏（cáng）   分离，提纯好的羊肚（dù）菌菌种以后需要及（jí）时（shí）进行（háng）菌种保藏处理，具体请参照菌种（zhǒng）保藏方法 在适当（dāng）的（de）季节进行出菇栽培实验。